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体外哺乳动物细胞染色体畸变试验仪

2025年04月28日 09:35:30 人气: 158 来源: 上海徽涛自动化设备有限公司

体外哺乳动物细胞染色体畸变试验仪

一、 仪器介绍

实验目的:

本试验检测受试物是否引起培养的哺乳动物细胞染色体畸变,以评价受试物致突变的可能性

实验概述:

在加入和不加入代谢活化系统的条件下,使培养的哺乳动物细胞暴露于受试物中。用中期分裂相阻断剂(如秋水仙素或秋水仙胺)处理,使细胞停止在中期分裂相,随后收获细胞,制片,染色,分析染色体畸变。

大部分的致突变剂导致染色单体型畸变,偶有染色体型畸变发生。虽然多倍体的增加可能预示着有染色体数目畸变的可能,但本方法并不适合用于测定染色体的数目畸变。

应用范围

应用于科研、农业、卫生、教育、雾霾状态可吸入颗粒染毒效果研究等各个领域

符合标准:

GB/T 15670.19-2017《农药登记毒理学试验方法第19部分:体外哺乳动物细胞染色体

畸变试验》

二、试验流程

1)细胞培养

选择合适细胞系,在含血清培养基中培养至对数生长期。

2)受试物处理

设置多个浓度组(需包括细胞毒性评估,如50%生长抑制浓度)

阳性对照

阴性对照(溶剂对照)

3.)代谢活化系统(S9混合液)

模拟体内代谢,用于检测需代谢激活的致突变物(如加Aroclor 1254诱导的大鼠肝S9

4.)采样时间

短期处理:1个细胞周期(通常24小时,含或不含S9

长期处理:覆盖多个细胞周期(如48小时)

5)染色体制备

秋水仙素(或秋水仙胺)处理:阻断中期细胞。

低渗处理(KCI溶液)使细胞膨胀。

固定(甲醇:冰醋酸=3:1)后滴片,Giemsa染色。

6)镜检分析

显微镜下观察至少200个中期分裂相,记录畸变类型和频率

 

 

 

三、仪器与试剂

关键仪器:

培养箱、生物安全柜、离心机、显微镜(配备油镜和图像分析系统)

染色体自动扫描仪(可选)

主要试剂:

细胞培养基、胎牛血清

秋水仙素、Giemsa染液、S9混合液。

 

 

 

 

 

 

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